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    Novus試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因做出分析

    發(fā)布時間: 2022-06-21  點擊次數(shù): 630次
      Novus試劑盒內(nèi)包含了實驗所需的所有試劑和相關(guān)組份。簡單快捷的方案設(shè)計和優(yōu)化的試劑配比,為全球科研工作者提供實驗分析方案。該試劑盒內(nèi)含有分析所需的所有必需試劑,操作簡單便捷;試劑盒內(nèi)組分經(jīng)實驗優(yōu)化,確保更高的檢測靈敏度。
     
      Novus試劑盒的實驗原理:
      試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
     
      Novus試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因做出分析:
      1、剛加完顯色劑時梯度明顯:顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的;
      2、酶濃度太高,導(dǎo)致最終顯色結(jié)果都是高的;
      3、包被-酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或許酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強,或許酶標(biāo)儀讀數(shù)規(guī)劃不夠;
      4、樣本中有可以催化底物的物質(zhì),沒洗下來;
      5、建議:包被、酶標(biāo)重新做梯度,先用較低的濃度把梯度探究好,然后再優(yōu)化靈敏度,最終調(diào)出所需的靈敏度、線性規(guī)劃;
      6、有條件的話,可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上,加完底物三分鐘讀數(shù);
      7、蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了;
      8、酶是自己標(biāo)的這種情況的,HRP比例不要太高。
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